AbFlex® リコンビナント抗体

高い特異性かつ再現性をもつ抗体

AbFlex抗体は,非常に特異的かつ再現性がある抗体を産生するために規定されたDNA配列を用いて生成されたリコンビナント抗体(rAb)です。 AbFlex抗体のユニークな利点は標識と精製オプションにあります。各AbFlex抗体にはSortase認識モチーフ(LPXTG)が含まれています。このSortase認識モチーフは蛍光物質酵素基質(HRPAPなど)ペプチドDNA薬物または他の標識を,直接的かつ再現性のある方法でこの抗体に共有結合により付加することができます。すべての抗体はニッケルベースの精製システムと一緒に使用することが可能な,6xHisタグおよびビオチンリガーゼ BirAを用いたビオチン結合のためのアビジンタグ配列も含んでいます。

AbFlex antibody with flexible labeling and purification options
 

AbFlex®リコンビナント抗体(rAb)は様々な標識と精製オプションを備えています

AbFlex抗体は,抗原認識および機能への干渉を避けるために,重鎖の定常領域の末端が特異的に標識されています。これは標識化プロセスが抗体の完全性を維持することを保証し,シグナルが非機能性抗体の結果として減少しないことにおいて重要です。対照的に、一般的に使用される化学的標識方法は、抗体にランダムに標識を加えます。このランダムなプロセスは,抗原結合部位をブロックし、抗体を無効化する可能性が高くなります。また化学的標識は,プロテインAとの相互作用を妨げる可能性のある抗体のFc領域に標識を付けることもあります。

AbFlex directed labeling versus chemical labeling

AbFlex®直接標識と化学標識との標識配置の違い 

リコンビナント抗体開発以前は,研究者はポリクローナルおよびモノクローナル抗体に依存していました。ポリクローナル抗体は,同じ抗原上の複数のエピトープを認識します。これは抗体親和性を増加させますが,しばしば交差反応性の可能性が高くなります。モノクローナル抗体は,一つのユニークなエピトープに結合するB細胞を産生する単一抗体です。しかしながら,モノクローナル抗体は,時間的経過で失われたり,進化したりする可能性があります。

モノクローナル抗体は,抗体ロット全体の可変性をもたらし,時間的経過で抗体の性能を変化させる遺伝子欠損,突然変異および細胞株ドリフトを起こす可能性がありますが,リコンビナント抗体はモノクローナル抗体とは異なり,どのロットも同じ免疫グロブリン重鎖および軽鎖のDNA配列を含むため,高い一貫性があります。これにより,抗体性能のバッチ間の再現性が得られ,異なる抗体ロットを再評価または比較する必要がなくなることで,アッセイ開発に貴重な時間と労力を節約できます。

最適な性能を保証するために,各AbFlex抗体は,特異性および感度について注意深くスクリーニングが行われています。弊社のビーズベースの結合アッセイにおいて確認されたように,非常に特異的な抗体を産生する重鎖および軽鎖配列のみが選択されます。 またAbFlex直接標識アプローチを利用する抗体も,様々なアプリケーションにわたって親モノクローナル抗体よりも高い感受性を示します。

AbFlexリコンビナント抗体の別の利点として,アニマルフリーで生産されることです。ポリクローナル抗体は、動物の免疫応答およびエピトープ特異性に依存しており,両方とも動物および免疫化によって非常に変化します。またポリクローナル抗体は供給の限界があるのため,長期間の抗体プロジェクトの実施や時間的経過または研究室間にわたって同様なデータを再現することは困難になります。 AbFlexリコンビナント抗体では,完全長IgGは哺乳動物系で発現させることで,一貫して安定な抗体供給を保証します。さらに抗体産生および維持に関連する倫理的または動物愛護上の懸念が回避されます。

AbFlex®リコンビナント抗体(rAb)の利点

  • 標識および精製オプション
  • ロット間での一貫した性能
  • 高い特異性および高感度抗体
  • 信頼性の高い長期供給
  • アニマルフリー生産

以下のリストは,アクティブ・モティフ社AbFlexリコンビナント抗体(rAb)です。
 
Name Isotype Reactivity Appl. Format Cat No. Price  
AbFlex® 5-methylcytosine antibody (rAb) IgG2a Not Species Specific DB 100 µg 91187 ¥62,000 Buy
10 µg 91188 ¥17,000 Buy
AbFlex® Ago 1/2/3 antibody (rAb) IgG2a Human IP 100 µg 91217 ¥62,000 Buy
10 µg 91218 ¥17,000 Buy
AbFlex® AM-Tag antibody (rAb) IgG2a Human, Not Species Specific ChIP, ELISA, WB 100 µg 91111 ¥62,000 Buy
10 µg 91112 ¥17,000 Buy
AbFlex® AM-Tag antibody (rAb) (biotin) IgG2a Human, Not Species Specific ChIP, ELISA, WB 100 µg 91109 N/A
10 µg 91110 N/A
AbFlex® ATM phospho Ser1981 antibody (rAb) IgG2a Human, Mouse DB, WB 100 µg 91207 ¥62,000 Buy
10 µg 91208 ¥17,000 Buy
AbFlex® Bcl6 antibody (rAb) IgG2a Human WB 100 µg 91287 ¥62,000 Buy
10 µg 91288 ¥17,000 Buy
AbFlex® BMI-1 antibody (rAb) IgG2a Human, Mouse ChIP, ChIP-Seq, WB 100 µg 91195 ¥62,000 Buy
10 µg 91196 ¥17,000 Buy
AbFlex® BRD4 antibody (rAb) IgG Human ChIP, ChIP-Seq 100 µg 91301 ¥62,000 Buy
10 µg 91302 ¥17,000 Buy
AbFlex® BrdU antibody (rAb) IgG2a Human, Not Species Specific IF 100 µg 91269 ¥62,000 Buy
10 µg 91270 ¥17,000 Buy
AbFlex® Cas9 antibody (rAb) IgG2a Human ELISA, WB 100 µg 91123 ¥62,000 Buy
10 µg 91124 ¥17,000 Buy

AbFlex® antibodies are recombinant antibodies (rAbs) that have been generated using defined DNA sequences to produce highly specific, reproducible antibodies. The unique advantages of the AbFlex® antibody are its flexible labeling and purification options. Each AbFlex® antibody contains a Sortase recognition motif (LPXTG) to covalently add fluorophores, enzymatic substrates (HRP, AP...etc), peptides, DNA, drugs or other labels to the antibody in a directed and reproducible manner using our Sortag-IT Labeling Kits. Every antibody also contains a 6xHis tag, which can be used with nickel-based purification systems, and an avidin tag sequence for enzymatic biotin conjugation using the biotin ligase, BirA.

AbFlex antibody with flexible labeling and purification options
AbFlex® recombinant antibody (rAb) with flexible labeling and purification options.

AbFlex® antibodies are specifically labeled at the end of the constant region of the heavy chain to avoid interference with antigen recognition and functionality. This is important as it ensures the labeling process maintains the integrity of the antibody so signal is not diminished as a result of non-functional antibodies. In contrast, commonly used chemical labeling methods add labels to the antibody in a random fashion. The randomness of this process has a high potential to block the antigen-binding site and render the antibody ineffective. Chemical labeling can also deposit labels on the Fc region of the antibody which has the potential to obstruct interactions with protein A.

AbFlex® directed labeling versus chemical labeling
Differences in label distribution between AbFlex® direct labeling and chemical labeling.

 

Prior to the development of recombinant antibodies, researchers relied on polyclonal and monoclonal antibodies. Polyclonal antibodies recognize multiple epitopes on the same antigen. This increases antibody affinity, but often has a higher potential for cross-reactivity. Monoclonal antibodies represent a single antibody producing B cell that binds to one unique epitope. However, monoclonal antibodies can be lost or evolve over time.

Unlike monoclonal antibodies, which can experience gene loss, mutations and cell-line drift that alter antibody performance over time and lead to variability across antibody lots, recombinant antibodies are highly consistent because they contain the same immunoglobulin heavy and light chain DNA sequences in every lot. This provides batch-to-batch reproducibility in antibody performance and eliminates the need to re-evaluate or compare different antibody lots, thereby, saving valuable time and effort on assay development.

To ensure optimal performance, each AbFlex® antibody is carefully screened for specificity and sensitivity. Only heavy and light chain sequences that produce highly specific antibodies, as verified in our bead-based binding assay, are selected. Antibodies that utilize the AbFlex® direct labeling approach also show greater sensitivity than their parent monoclonal antibodies across a variety of applications.

Another advantage of AbFlex® recombinant antibodies is the fact that they are produced outside of an animal system. Polyclonal antibodies rely on an animal’s immune response and epitope specificity, both of which are highly variable across animals and immunizations. Polyclonal antibodies are also hindered by having a finite supply, making it difficult to perform long-term antibody projects or reproduce data over time or across labs. With AbFlex® recombinant antibodies, the full-length IgG is expressed in a mammalian system to ensure a consistent, stable antibody supply. Additionally, any ethical or animal welfare concerns associated with antibody production and maintenance are avoided.

The following list contains Active Motif's AbFlex® recombinant antibodies (rAbs). For information about site-specific labeling of the AbFlex® antibodies, please visit our collection of Sortag-IT™ Labeling Kits.